ABSTRACT
A raiva é uma antropozoonose viral que se desenvolve de forma progressiva e aguda podendo apresentar até 100% de letalidade. O seu agente etiológico é o vírus rábico do gênero Lyssavirus pertencente à família Rhabdoviridae. O presente trabalho teve como objetivo divulgar informações acerca da ocorrência da raiva em humanos em virtude da sua expressiva importância para saúde pública e analisar a percepção da população sobre a raiva humana, de forma a obter dados relacionados a conhecimentos básicos sobre a doença. Para isso, foi criada uma página informativa denominada "@contraraiva_" na rede social Instagram para a realização de postagens interativas sobre o tema abordado, e uso de um questionário criado a partir da plataforma Google Forms em diferentes mídias sociais para a obtenção e coleta de dados. Foram obtidas 1.075 respostas, provenientes de diferentes localidades. O questionário alcançou todas as regiões brasileiras, todos 26 estados e o Distrito Federal. As informações publicadas pela página criada ajudaram a sanar dúvidas relacionadas aos principais aspectos da doença. Os dados obtidos a partir do questionário contribuem para o planejamento de ações voltadas para a educação em saúde de forma mais estratégica, visando contribuir para os pontos em que a população tem menos conhecimentos.(AU)
Rabies is a viral anthropozoonosis that is developed in a progressive and acute way and can present up to 100% lethality. Its etiologic agent is the rabies virus of the Lyssavirus gene belonging to the Rhabdoviridae family. This study aimed at disseminating information about the occurrence of rabies in humans due to its expressive importance for public health, and at analyzing the population perception on human rabies in order to obtain data related to basic knowledge about the disease. For that purpose, an information page called "@ contraraiva _" was created on the social network Instagram for providing interactive posts on the topic, and a questionnaire was created from the Google Forms platform on different social media to obtain and collect data. A total of 1,075 responses were obtained from different locations. The questionnaire included all Brazilian regions, all 26 states and the Federal District. The information published on the created page helped to clarify doubts related to the main aspects of the disease. The data obtained from the questionnaire contribute towards the planning of actions aimed at health education in a more strategic way, aiming at contributing to the points where the population is less knowledgeable.(AU)
La rabia es una antropozoonosis viral que se desarrolla de forma progresiva y aguda y puede presentar hasta un 100% de letalidad. Su agente etiológico es el virus de la rabia del género Lyssavirus perteneciente a la familia Rhabdoviridae. Este estudio tuvo como objetivo difundir informaciones sobre la ocurrencia de la rabia en humanos en virtud de su importancia expresiva para la salud pública, y analizar la percepción de la población sobre la rabia humana, con el fin de obtener datos relacionados a los conocimientos básicos sobre la enfermedad. Para ello, se creó una página de información denominada "@ contraraiva _" en la red social Instagram para realizar publicaciones interactivas sobre el tema abordado, y utilizar un cuestionario creado a partir de la plataforma Google Forms en diferentes redes sociales para la obtención y recolección de datos. Se obtuvieron 1.075 respuestas de diferentes lugares. El cuestionario llegó a todas las regiones brasileñas, a los 26 estados y al Distrito Federal. Las informaciones publicadas en el sitio web creado, ayudaron a sanar dudas relacionadas a los principales aspectos de la enfermedad. Los datos obtenidos del cuestionario contribuyen a la planificación de acciones orientadas a la educación para la salud de forma más estratégica, con el objetivo de contribuir a los puntos donde la población tiene menos conocimientos.(AU)
Subject(s)
Rabies , Rabies virus , Public Health , Health Education , Lyssavirus , Surveys and QuestionnairesABSTRACT
Chitosan is a biocompatible and biodegradable mucoadhesive polymer with unique advantages, such as the distinct trait of opening the junctions to allow paracellular transport of antigen and good tolerability. However, the poor solubility of chitosan in neutral or alkalinized media has restricted its applications in the pharmaceutical field. Chitosan can be easily carboxymethylated to improve its solubility in aqueous media, while its biodegradability and biocompatibility are preserved. Apart from this, carboxymethyl chitosan (CMCS) can be easily processed into nanoparticles which highlight its suitability and extensive usage for preparing different drug delivery formulations. The present study deals with the development and characterization of a delivery system based on CMCS nanoparticles using ovalbumin as model protein. We demonstrated that ovalbumin loaded nanoparticles were successfully synthetized using calcium chloride as a cross-linker by ionic gelation. The nanoparticles exhibited an average size of approximately 169 nm and presented a pseudo-spherical shape. The nanoparticles size increased according to the addition of CaCl2 due to the strong electrostatic attraction. During storage the nanoparticles size increased was attributed to swelling and aggregation. The loading efficiency of ovalbumin was found to be 17%. Confocal microscopy clearly showed the association between ovalbumin and CMCS chains into nanoparticles. Therefore, we suggest these nanoparticles can be considered as an attractive and promising carrier candidate for proteins and antigens. The major challenge that limits the use of such carriers is their instability in an aqueous medium. Thus, the next step of this work was to determine the robustness of several formulations using distinct freeze-drying protocols. This study demonstrated that mannitol in concentration of 10% (w/v) is well suited to preserve ovalbumin loaded CMCS nanocapsules from aggregation during lyophilization and subsequent reconstitution. Importantly, the results showed that an annealing step has a huge impact on porosity of freeze-dried cake by nearly complete crystallization of mannitol, once the crystalline matrix prevents the partial collapse and the formation of larger pores observed without annealing. Therefore, the usual observation that annealing increases the pore size due to growth of ice crystal size does not always apply, at least when crystallization of solute is involved. Since all characterizations and stability studies had been performed, the main purpose of this study was to develop a stable antigen delivery system for oral immunization using CMCS and inactivated rabies virus (RV) as the antigen. RV loaded nanoparticles was found to enhance both systemic (IgG) and local (IgA) immune responses against RV after oral delivery in mice. The effective doses 50% were 50-times higher than the negative controls, indicating that the immune response started only after the third boosting dose. Furthermore, enough neutralizing antibodies was produced to be protected against the harmful effects of the rabies virus. It is therefore concluded, that the CMCS nanoparticles formulated in this study, are suitable for oral vaccine delivery, and can be suggested as a promising delivery system for a diverse range of antigens as well as a gene/protein delivery system, especially for those positively charged. Since several approaches show that effective intervention in airway allergic inflammation can be achieved with allergen-activated interleukin-10-secreting cells, the final part of this work was dedicated to assessing whether IL-10 loaded chitosan nanoparticles (IL10-CSNPs) could be used as a possible inhalable therapeutic tool for preventing exacerbations in asthmatic patients. As positive controls, we also assess whether interleukin 17A and interleukin 9 have the ability to stimulate human airway smooth muscle (HASM) cell contractility using magnetic twisting cytometry (MTC). Significant decreased baseline cell stiffness was observed in HASM cells pre-treated with IL-10, but not with IL10-CSNPs, whereas treatment with IL-17A significantly enhanced baseline cell stiffening. Our findings reveal a previously unknown mechanism underlying immunotherapy for prevention and treatment of asthma
A quitosana é um polímero mucoadesivo biocompatível e biodegradável, com vantagens únicas, tais como a característica distinta de abrir as junções que permitim o transporte paracelular de antígenos e boa tolerabilidade. No entanto, sua baixa solubilidade em meios neutros ou alcalinizados tem restringido suas aplicações no campo farmacêutico. A quitosana pode ser facilmente carboximetilada para melhorar de sua solubilidade em meios aquosos, enquanto sua biodegradabilidade e biocompatibilidade são preservadas. Além disso, a carboximetilquitosana (CMCS) pode ser facilmente processada na forma de nanopartículas, o que destaca sua adequabilidade para uso extensivo no preparo de sistemas de delivery de medicamentos. O presente estudo trata do desenvolvimento e caracterização de um sistema de delivery baseado em nanopartículas de CMCS utilizando ovalbumina como proteína modelo. Nós demonstramos que as nanopartículas carregadas com ovalbumina foram sintetizadas com sucesso utilizando cloreto de cálcio como agente de reticulação por gelificação iônica. As nanopartículas exibiram um tamanho médio de aproximadamente 169 nm e apresentaram uma forma pseudo-esférica. O tamanho das nanopartículas aumentou de acordo com a adição de CaCl2 devido à forte atração eletrostática. Durante o armazenamento, o tamanho aumentado das nanopartículas foi atribuído a incorporação de água e agregação. A eficiência de encapsulamento da ovalbumina foi de aproximadamente 17%. A microscopia confocal mostrou claramente a associação entre ovalbumina e a cadeias de CMCS nas nanopartículas. Sugerimos, portanto, que tal sistema pode ser considerado como candidato atraente e promissor para o carreamento de proteínas e antígenos. O principal desafio que limita o uso desses carreadores consiste na instabilidade em meio aquoso. Assim, o próximo passo deste trabalho foi determinar a robustez de várias formulações utilizandose diferentes protocolos de liofilização. Este estudo demonstrou que o manitol em uma concentração de 10% (p/v) é adequado para preservar da agregação as nanocápsulas de CMCS carregadas com ovalbumina durante a liofilização e subsequente reconstituição. Mais importante, os resultados mostraram que uma etapa de annealing tem um enorme impacto sobre a porosidade da amostra liofilizada devido a quase completa cristalização do manitol, uma vez que a matriz cristalina evita o colapso parcial e a formação de poros maiores observados na ausência do annealing. Portanto, a observação comum de que o annealing aumenta o tamanho doporos devido ao crescimento dos cristais de gelo nem sempre se aplica, pelo menos quando a cristalização de um soluto está envolvida. Uma vez que todas as caracterizações e estudos de estabilidade foram realizados, o principal objetivo deste estudo foi desenvolver um sistema estável de delivery de antígeno para imunização oral utilizando CMCS e vírus rábico inativado (RV) como antígeno. Verificou-se que as nanopartículas carregadas com RV aumentam as respostas imune sistêmica (IgG) e local (IgA) contra o RV após administração oral em camundongos. As doses efetivas 50% foram 50 vezes maiores que os controles negativos, indicando que a resposta imune foi iniciada apenas após a terceira dose da vacina. Além disso, foram produzidos anticorpos neutralizantes suficientes para proteção contra os efeitos nocivos do vírus rábico. Conclui-se, portanto, que as nanopartículas de CMCS formuladas neste estudo, são adequadas para o delivery oral de vacinas, e podem ser sugeridas como um sistema promissor de delivery para uma gama diversa de antígenos, bem como para o delivery de genes/proteínas, especialmente para aqueles carregados positivamente. Uma vez que diversas abordagens mostram que uma intervenção efetiva em casos de inflamação alérgica de vias aéreas pode ser conseguida por meio de células secretoras de interleucina 10 (IL-10) mediante ativação por alergenos, a parte final deste trabalho esteve dedicada a avaliação de nanopartículas de quitosana carregadas com IL-10 (IL10-CSNPs) como possível ferramenta terapêutica inalável para prevenção de exacerbações em pacientes asmáticos. Como controles positivos, avaliou-se adicionalmente se as interleucinas 17A (IL-17A) e 9 (IL-9) possuem a capacidade de estimular a contratilidade de células humanas de músculo liso de vias aéreas humanas (HASM) por meio de citometria de torção magnética (MTC). Uma diminuição significativa da rigidez celular basal foi observada em células HASM pré-tratadas com IL-10, mas não com IL10-CSNPs, enquanto que o tratamento com IL-17A aumentou significativamente a magnitude rigidez celular basal. Nossos resultados revelam um mecanismo previamente desconhecido subjacente à imunoterapia para prevenção e tratamento da asma
Subject(s)
Asthma/pathology , In Vitro Techniques/instrumentation , Pharmaceutical Preparations , Ovalbumin/analysis , Chitosan/analysis , Administration, Oral , Interleukins/pharmacology , Microscopy, Confocal/methods , Nanocapsules , Nanoparticles/classification , Freeze Drying/methodsABSTRACT
A raiva é uma enfermidade causada por um vírus RNA pertencente à família Rhabdoviridae e gênero Lyssavirus e está entre as viroses mais importantes para a saúde pública, pois pode acometer todas as espécies de mamíferos e ser transmitida ao ser humano caso haja agressão por parte do animal infectado. A primeira descrição de raiva confirmada em morcegos não-hematófagos foi feita em 1931, desde então, na América Latina esta doença foi diagnosticada em mais de 50 espécies de morcegos não-hematófagos e, no Brasil, em cerca de 30 espécies. O presente trabalho teve por objetivo investigar a ocorrência de raiva em quirópteros no município de Japurá, Paraná, a partir do diagnóstico em animais moribundos ou recém mortos. Utilizaram-se 16 animais, coletados pela população do município durante o mês de abril de 2007. Do total de espécimes analisados, nenhum apresentou resultado positivo para o vírus rábico. Esses resultados contribuem com as informações acerca do panorama da raiva no noroeste do Paraná e sugerem a necessidade de novos estudos contemplando uma maior amostra de morcegos no município.
Rabies is a disease caused by a RNA virus belonging to the Rhaboviridae family, Lyssavirus genus. It is among the most important viroses for the public health, since it may infect all mammalian species and may be transmitted to humans in case of aggression by an infected animal. The first description of confirmed rabies in non-hematophagous bats was made in 1931, and since then, in Latin America, the disease was diagnosed in more than 50 species of non-hematophagous bats and, in Brazil, in about 30 species. The present work aimed at investigating the occurrence of rabies in chiropterans in city of Japurá, Paraná, Brazil, in very sick or recently killed animals. 16 animals were used. The animals were collected by the population of the city during the month of April, 2007. From the specimens analyzed, none presented a positive result for rabies virus. These results contribute with information about the rabies panorama in the northwest of Paraná and suggest the need for new studies, using a greater sample of bats in the city.
La rabia es una enfermedad causada por un virus RNA perteneciente a la familia Rhabdoviridae y género Lyssavirus, y está entre las virosis más importantes para la salud pública, pues puede acometer todas las especies de mamíferos y ser transmitida al ser humano caso haya agresión por parte del animal infectado. La primera descripción de rabia confirmada en murciélagos no-hematófagos se hizo en 1931, desde entonces, en América Latina esta enfermedad se diagnosticó en más de 50 especies de murciélagos no-hematófagos y, en Brasil, cerca de 30 especies. Esta investigación tuvo por objetivo estudiar la ocurrencia de rabia en quirópteros en el municipio de Japurá, Paraná, a partir del diagnóstico en animales moribundos o recién muertos. Se utilizó 16 animales, colectados por la población del municipio durante el mes de abril de 2007. Del total de especímenes analizados, ninguno presentó resultado positivo para el virus rábico. Esos resultados contribuyen con las informaciones acerca del panorama de la rabia en el noroeste de Paraná y sugieren necesidad de nuevos estudios contemplando una mayor muestra de murciélagos en el municipio.
ABSTRACT
Caracterizou-se filogeneticamente o vírus da raiva, isolado de morcegos hematógafos (Demodus rotundus). Cento e noventa e nove D. rotundus foram capturados em cinco abrigos, no Norte e Noroeste do Estado do Rio de Janeiro e sul do Espírito Santo. Sete deles foram positivos para a raiva. Amostras desses vírus foram sequenciadas e comparadas com sequências provenientes de diversos estados brasileiros. As sequências de vírus da raiva isoladas, na região norte do Estado do Rio de Janeiro, mostraram características que as distinguem de amostras de vírus isoladas em outras regiões do país, no entanto foram idênticas às isoladas de bovinos no noroeste do Rio de Janeiro.
Rabies samples isolated from vampire bats captured in the Rio de Janeiro State were phylogenetically analyzed. One hundred and ninety nine vampire bats were captured from five shelters from North and Northwest of Rio de Janeiro and South of Espírito Santo States. Seven of them were positive for rabies. Theses samples were sequenced and compared with rabies virus sequences from several Brazilian states. The sequences of rabies virus, isolated in the present work, from North of Rio de Janeiro State, showed characteristics that differ of the sequences isolated from bats from other Brazilian regions. However, they were identical to samples isolated from cattle in Northwest of Rio de Janeiro state.
Subject(s)
Animals , Rabies virus/isolation & purification , Rabies virus/pathogenicity , Phylogeny , Chiroptera/anatomy & histology , Chiroptera/bloodABSTRACT
To determine the presence of rabies virus in the parotid salivary glands, 12 road-killed rabies-positive hoary foxes (Pseudoalopex vetulus) were tested by using the fluorescent antibody test (FAT) and mouse inoculation test (MIT). All 12 parotid salivary glands were positive for both tests, although in some cases several passages were required. The findings of this study support the importance of the hoary fox as rabies reservoir in the semi-arid region of Paraíba State, Northeastern Brazil.
Para determinar a presença de vírus rábico em glândulas salivares parótidas, 12 raposas (Pseudalopex vetulus) atropeladas em rodovias e positivas para raiva foram testadas pelo teste de imunofluorescência direta (IFD) e teste de inoculação em camundongos (IC). Todas as 12 glândulas salivares parótidas foram positivas em ambos os testes, embora, em alguns casos, várias passagens terem sido necessárias. Os achados do presente trabalho reforçam a importância das raposas como reservatórios de raiva no semi-árido do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil.
ABSTRACT
No Paraná poucos estudos foram realizados sobre a presença do vírus rábico em morcegos, sendo a maioriadas pesquisas feitas nos grandes centros urbanos e em parques próximos às cidades. O presente trabalho teve como objetivo detectar a presença do vírus rábico em filostomídeos não hematófagos, coletados em um fragmento florestal na região de Porto Rico, Paraná. O estudo foi realizado no mês de março de 2006 e foram coletados exemplares de Carollia perspicillata, Artibeus lituratus, A. jamaicensis e Sturnira lilium. Amostras de encéfalo dos morcegos foram extraídas e encaminhadas para análise no Laboratório Central de Saúde Pública do Paraná (LACEN/ PR) onde foram empregadas as técnicas de imunoflorescência direta e prova biológica em camundongos. Das 16 amostras encaminhadas, todas apresentaram resultados negativos, indicando, assim, sanidade dos morcegos amostrados para o vírus rábico na região de Porto Rico, o que sugere a necessidade de novos estudos, a fim de conferir um panorama maior e mais preciso sobre a contaminação de quirópteros por tal enfermidade.
A few studies have been conducted in the state of Paraná respect to rabies virus in bats most of the researches were conducted in large cities and in parks next to the cities. This study has the purpose of identifying the occurrence of rabies virus in non-hematophagous phyllostomideos collected in a forest segment in the region of Porto Rico, Paraná. It was carried out in March, 2006 and samples of Carollia perspicillata, Artibeus lituratus, A. jamaicensis and Sturnira lilium were collected. Their encephalus were removed and analyzed at the Laboratório Central de Saúde Pública do Paraná (LACEN/ PR), where direct immunofluorescense and biological proof in mice were conducted. All 16 samples presented negative results,thus indicating sanity for the bats sampled for rabic virus in the region of Porto Rico, what suggests the need for new studies in order to establish a broader and more precise overview with respect to the contamination of chiroptera by such disease.
En Paraná pocos estudios fueron realizados sobre la presencia del virus rábico en murciélagos, siendo la mayoríade las investigaciones hechas en los grandes centros urbanos y en parques próximos a las ciudades. Esta investigación tuvo como objetivo detectar la presencia del virus rábico en filostomídeos no hematófagos, colectados en un fragmento forestalen la región de Porto Rico - Paraná. El estudio fue realizado en el mes de marzo de 2006 y fueron colectados ejemplares de Carollia perspicillata, Artibeus lituratus, A. jamaicensis y Sturnira lilium. Muestras de encéfalos fueron extraídas y encaminadas para análisis en el Laboratorio Central de Salud Pública del Paraná (LACEN/ PR), donde fueron utilizadas las técnicas de inmunoflorescencia directa y prueba biológica en ratas. De las 16 muestras encaminadas, todas presentaron resultados negativos, indicando, así, la sanidad de los murciélagos pesquisados para el virus rábico en la región de Porto Rico, lo que sugiere la necesidad de nuevos estudios, a fin de conferir un panorama mayor y más preciso sobre la contaminación de quirópteros por tal enfermedad.
Subject(s)
Animals , Measures of Disease Occurrence , Chiroptera , Rabies virus/isolation & purificationABSTRACT
Rabies glycoprotein is the only exposed protein which is inserted in the viral lipidie envelope. This 65-67 kda protein is a N-glycosilated transmembrane protein forming trimers on the viral surface. It has been identified as the major pathogenicity determinant, playing a role in the budding, viral axonal transport during infection, apoptosis and immune evasion. It is also the major antigen responsible for the protective immune response and it is been used in commercial recombinant vaccines. Its structure, antigenicity and pathogenic role have been well studied, identifying main antigenic sites that have the responsibility for virulence, cellular receptors attachment and epitope acquisition.
La glicoproteína del virus rábico es la única proteína viral expuesta, encontrándose inserta en la envoltura lipídica. Esta molécula de 65-67 kda corresponde a una proteína trans-membrana N-glicosilada que se dispone en forma de trímeros en la superficie viral. Ha sido identificada como el mayor determinante de pato-genicidad, participando además en procesos de yemación, flujo axonal del virion durante la infección, apoptosis y evasión de la respuesta inmune. Es también el principal antígeno inductor de la respuesta inmune protectora siendo utilizado en vacunas recom-binantes comerciales. Su estructura, antigenicidad e implicancias en la patogenia han sido bien estudiadas identificándose los principales sitios antigénicos responsables de la patogenicidad, unión a receptores celulares y formación de epitopos.
Subject(s)
Animals , Humans , Antigens, Viral , Glycoproteins , Rabies virus/pathogenicity , Viral Envelope Proteins , Antigens, Viral/chemistry , Antigens, Viral/immunology , Antigens, Viral/physiology , Glycoproteins/chemistry , Glycoproteins/immunology , Glycoproteins/physiology , Protein Conformation , Rabies virus/immunology , Rabies virus/metabolism , Virulence , Viral Envelope Proteins/chemistry , Viral Envelope Proteins/immunology , Viral Envelope Proteins/physiologyABSTRACT
The occurrence of rabies virus antigenic variants in North and Central West regions of Brazil was studied using 61 rabies viruses isolated from different species: 30 from domestic dogs, 20 from cattle, four from horses, two from cats, one from a human and four from unidentified species. The isolates were submitted to antigenic analyses by indirect immunofluorescence with a panel of 12 monoclonal antibodies (Mabs) to lyssavirus antigens. Antigenic analyses revealed consistent differences between isolates whose natural hosts were dogs and those of haematophagous bats, often isolated from cattle. Three out of four isolates from horses and one from a domestic dog showed patterns of reactivity found only in viruses of insectivorous bats, indicating that non-haematophagous bats do play a unique role in the transmission of the virus to other species.